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小鼠ELISA試劑盒標本的采取與保存

2023-11-28 [944]


大部分小鼠ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。

1.血清標本可按常規(guī)方法采集,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標記的小鼠ELISA試劑盒測定中,如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應。


2.一般說來,在5 天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。


3.超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。


4.混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。


5.反復凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。


6.保存血清自采集時就應注意無菌操作,也可加入適當防腐劑。


7.抗凝不完-全的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。


8.加樣時應將所加物加在小鼠ELISA試劑盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出。


9.在建立小鼠ELISA試劑盒方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經(jīng)1-2 小時,產(chǎn)物的生成可達頂-峰。


10.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,小鼠ELISA試劑盒也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,反應板不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。


11.應注意溫育的溫度和時間應按規(guī)定力求準確。


12.由于公司的ELISA試劑盒溫育是在空氣浴中完成,采用水浴會造成值偏高或花板。


13.另外溫育中還有邊緣效應,邊上的值會偏高,建議為了客觀的判斷結果,將質(zhì)控放在非邊緣位置。

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